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血清出現沉淀的原因及影響


血清中出現沉淀物是一個相對常見的現象,這些沉淀物可能由多種物質構成,包括但不限于纖維蛋白、膽固醇、脂肪酸酯、蛋白質以及磷酸鈣等。以下是對血清中出現沉淀問題的詳細分析:

一、血清沉淀物的類型及成因

1.纖維蛋白:纖維蛋白是血清中常見的沉淀物之一,尤其是當血清在低溫下收集和快速處理時,一些纖維蛋白原(可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體)在處理過程中仍處于溶解狀態。然而,當血清經過過濾分裝后,這些纖維蛋白原會在瓶中凝結,形成肉眼可見的纖維蛋白沉淀。

2.膽固醇、脂肪酸酯及蛋白質:這些物質在血清中也可能形成沉淀,尤其是在某些特定的條件下。

3.磷酸鈣:磷酸鈣是另一種常見的血清沉淀物,它通常會使血清出現渾濁的現象,并且在37℃培養時會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經常被誤認為是微生物污染。

二、血清沉淀的影響

1.過濾困難:當血清中出現大量的沉淀物時,血清將很難過濾。一般來說,血清在生產后已經經過嚴格的過濾處理和無菌檢測,因此不推薦再次過濾用于細胞培養的血清。

2.污染誤判:磷酸鈣沉淀往往被誤認為是微生物污染,導致研究者可能會進行不必要的無菌試驗,從而浪費時間和資源。

三、避免血清沉淀的方法

1.凍結與解凍:在凍結血清時,應隨時搖晃均勻,使溫度及成分均一,以減少沉積的發作。同時,應避免直接從-20℃直接解凍至37℃,因為溫度改變太大容易形成蛋白質凝結而發作沉積。

2.存儲條件:勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得污濁,且其中許多較不穩定的成分也會因此受到破壞,從而影響血清的質量。此外,長期存放在2~8℃也可能導致沉淀的增加。

3.熱滅活:血清的熱滅活過程十分簡單,但容易形成沉積物的增多。若非必要,可以無須進行此過程。若有必要進行熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的準則,并且隨時搖晃均勻。

綜上所述,血清中出現沉淀物是一個復雜的現象,涉及多種物質和條件。為了避免和減少沉淀物的產生,需要采取一系列的措施和方法來確保血清的質量和穩定性。

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