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恒遠(yuǎn)生物|小鼠T淋巴細(xì)胞 CTLL-2 培養(yǎng)攻略


一、細(xì)胞基本信息
品牌名稱:  恒遠(yuǎn)生物
產(chǎn)品貨號(hào):  HYCC20033
細(xì)胞名稱:CTLL-2
中文名稱:小鼠T淋巴細(xì)胞
種屬來(lái)源:小鼠
組織來(lái)源:T細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)

二、培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
溫度:37℃

三、培養(yǎng)基與添加物
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:RPMI-1640
添加物:10%特級(jí)胎牛血清(FBS)、100U/ml(或100IU/ml)IL-2、1%青霉素/鏈霉素(P/S)
注意,有些培養(yǎng)體系可能略有不同,但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。

四、細(xì)胞培養(yǎng)步驟

1. 細(xì)胞復(fù)蘇
從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管,迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
將解凍后的細(xì)胞懸液移至含5ml完全培養(yǎng)基的離心管中,1000rpm離心5min。
棄去上清液,補(bǔ)加5mL完全培養(yǎng)基后吹勻,接種于T25培養(yǎng)瓶中(或6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。
第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2. 細(xì)胞傳代
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
離心收集細(xì)胞(1000rpm,5-8min),棄去上清液。
補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中或6cm培養(yǎng)皿中。
對(duì)于較難培養(yǎng)的細(xì)胞或新手,可采用豎瓶培養(yǎng)法,逐步補(bǔ)加完全培養(yǎng)基,待細(xì)胞密度升高后再進(jìn)行傳代。

3. 細(xì)胞凍存
選擇生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存。
離心收集細(xì)胞(1000rpm,5-8min),去除上清液。
按凍存數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,輕輕混勻后,分裝入凍存管中(每管約1mL細(xì)胞懸液)。
將凍存管放入-80℃冰箱中過(guò)夜,然后轉(zhuǎn)入液氮罐中儲(chǔ)存。

五、培養(yǎng)注意事項(xiàng)
細(xì)胞接收與檢查:收到細(xì)胞后,首先檢查細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有異常,請(qǐng)及時(shí)與我司(恒遠(yuǎn)生物)聯(lián)系。
無(wú)菌操作:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,避免細(xì)胞污染。
細(xì)胞密度監(jiān)控:定期觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,及時(shí)傳代以避免細(xì)胞密度過(guò)高導(dǎo)致死亡。
培養(yǎng)基更換:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況和培養(yǎng)基顏色變化,適時(shí)更換新鮮培養(yǎng)基。

六、售后服務(wù)與細(xì)胞保存
若細(xì)胞在運(yùn)輸或培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)問題,應(yīng)及時(shí)與我司聯(lián)系并提供相關(guān)證據(jù)(如細(xì)胞照片、操作記錄等),以便進(jìn)行售后處理。細(xì)胞應(yīng)儲(chǔ)存在液氮罐中,避免反復(fù)凍融以確保細(xì)胞活性。

上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司擁有自己的實(shí)驗(yàn)室,備有專業(yè)的技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì),長(zhǎng)期致力于各種生物試劑,細(xì)胞,血清,ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售,實(shí)驗(yàn)提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),并提供精湛的技術(shù)服務(wù),如果您有實(shí)驗(yàn)上的問題歡迎前來(lái)咨詢,為您提供專業(yè)的一對(duì)一技術(shù)指導(dǎo)。 

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