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生化試劑盒
- 脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒-紫外分光光度法
- 恒遠生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛，涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富，涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀，分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測服務(wù)和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格，所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
| 中文名稱 |
脂肪酸合成酶（FAS）試劑盒 |
| 規(guī)格 | 24樣 |
| 貨號 |
L-762-SH |
| 價格 | ￥2000 |
| 樣本類型 | 血清，血漿，組織勻漿，細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液等 |
| 檢測范圍 | 詳見說明書 |
| 檢測方法 |
紫外分光光度法 |
| 貨期 | 3-5天 |
| 說明書 | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
| 文獻 | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶，催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中，在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。
測定原理：
FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+；NADPH在340nm有吸收峰，而NADP+沒有；通過測定340nm 光吸收下降速率，計算FAS活性。
自備儀器和用品：
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體25mL×1瓶，－20℃保存。用前1 d取出置于4℃充分解凍后混勻。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入550 μL試劑四，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入550 μL試劑四，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑四：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入1050 μL試劑四，充分溶解，用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
粗酶液提取：
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。12000g，4℃離心40min，取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后12000g，4℃，離心40min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體：直接測定。
FAS測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑四置于40℃水浴中預(yù)熱30 min。
3. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、20μL試劑二、20μL試劑三、820μL試劑四和40μL試劑五，迅速混勻后于340nm處測定吸光值，記錄第30s和90s時吸光值，分別記錄為A1和A2。△A測=A1-A2。
FAS活性計算公式：
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△A÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計算
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol/min/g 鮮重) = (△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷W
（3）按細胞數(shù)量計算
活性單位定義：37℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol /min/104cell) = (△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(細胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細胞數(shù)量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：37℃中每毫升樣本每分鐘氧化1nmol NADPH 為1個酶活單位。
FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103/mol/cm；d：比色皿光徑，1 cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，100μL=0.1 mL；T：反應(yīng)時間，1min。
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