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生化試劑盒

支鏈淀粉含量試劑盒-可見分光光度法
上海恒遠生物從事酶聯免疫學10年有余,技術成熟,產品穩定。恒遠品牌自主研發ELISA試劑盒,現已涵蓋20多個種屬,數千種產品,涉及腫瘤、激素、自身免疫、心血管、代謝等十多個研究領域。其ELISA試劑盒不僅檢測指標豐富,還可以根據實驗需求定制檢測范圍,并且提供實驗外包與免費代測服務。歡迎您來電咨詢。
中文名稱

支鏈淀粉含量試劑盒


規格 48樣
貨號 E-357-SH


價格 ¥800
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法 可見分光光度法
貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業務員獲取
文獻 咨詢我司業務員獲取


    正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

c加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響,對于不同比例直、支鏈淀粉的淀粉的研究具有重要的意義。

 

測定原理:

利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,利用雙波長比色法測定支鏈淀粉含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、乙醚和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制:

試劑一:液體50mL×1瓶;4℃保存;

試劑二:乙醚50mL×1瓶;4℃保存;(自備)

試劑三:液體50mL×1瓶;4℃保存;

試劑四:液體4mL×1瓶;4℃保存;

試劑五:液體1mL×1瓶;4℃保存;

 

淀粉提取: 

稱取0.01~0.02g烘干樣本(建議稱取約0.01g)于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉移到EP管中,80℃水浴提取30min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑二(乙醚)振蕩5min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑三充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后待測。

 

測定步驟:

1、 分光光度計預熱30min以上,蒸餾水調零。

測定管:在EP管中依次加入100uL樣本, 70uL試劑四,600uL蒸餾水,10uL試劑五,220uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA測定=A550-A743

空白管:在EP管中依次加入100uL試劑三,70uL試劑四,600uL蒸餾水,10uL試劑五,220uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA空白=A550-A743

 

支鏈淀粉含量計算:

標準條件下測定的回歸方程為y=0.1214x+0.0076x標準品濃度(mg/mL),y吸光

1按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×A測定-ΔA

 

空白-0.0076) ÷W

V1:加入反應體系中樣本體積,0.1mLV2:加入提取液體積,1 mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣質量,g

最低檢測限為10mg/g干重或0.1mg/mgprot


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