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生化試劑盒

支鏈淀粉含量試劑盒-微板法
恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛,涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。
我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業最優質的服務。
中文名稱

支鏈淀粉含量試劑盒


規格 96樣
貨號

E-358-SH

價格 ¥1500
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法 微板法
貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業務員獲取
文獻 咨詢我司業務員獲取


    正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

鏈淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例和含量對淀粉產品的加工、物化特性、糊化溫度等有著直接的影響,對于不同比例直、支鏈淀粉的淀粉的研究具有重要的意義。

 

測定原理:

利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,利用雙波長比色法測定支鏈淀粉含量。

需自備的儀器和用品:

酶標儀/可見分光光度計、水浴、可調式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰、乙醚和蒸餾水。

 

試劑的組成和配制:

試劑一:液體100mL×1瓶;4℃保存;

試劑二:乙醚100mL×1瓶;4℃保存;(自備)

試劑三:液體100mL×1瓶;4℃保存;

試劑四:液體2mL×1; 4℃保存;

試劑五:液體300uL×1; 4℃保存;

 

淀粉提取: 

稱取0.01~0.02g烘干樣本(建議稱取約0.01g)于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉移到EP管中,80℃水浴提取30min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑二(乙醚)振蕩5min3000g25℃離心5min,棄上清,留沉淀,加入1mL試劑三充分溶解,90℃水浴10min,冷卻后待測。

 

測定步驟:

1、 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,蒸餾水調零。

測定管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL樣本, 14uL試劑四,120uL蒸餾水,2uL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA測定=A550-A743

空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL試劑三, 14uL試劑四,120uL蒸餾水,2uL試劑五,44uL蒸餾水,混勻,分別測定550743nm處吸光值,ΔA空白=A550-A743

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

支鏈淀粉含量計算:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y=0.1214x+0.0076x標準品濃度(mg/mL),y吸光

1按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反應體系中樣本體積,0.02mLV2:加入提取液體積,1 mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣質量,g

 

b. 96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為y= 0.0607x+0.0076;x標準品濃度(mg/mL),y吸光

1按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1]÷0.0607 ÷(V1×Cpr)=16.47×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076V1] ÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47×A測定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1:加入反應體系中樣本體積,0.02mLV2:加入提取液體積,1 mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣質量,g

最低檢測限為10mg/g干重或0.1mg/mgprot

 

 


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