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生化試劑盒

總膽固醇(TC)含量試劑盒-可見(jiàn)分光光度法
恒遠(yuǎn)生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,涉及酶類(lèi)、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無(wú)機(jī)鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測(cè)樣本類(lèi)型豐富,涉及多種體液、組織、細(xì)胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測(cè)儀器為酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)和熒光酶標(biāo)儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶(hù)提供高效專(zhuān)業(yè)的生化代測(cè)服務(wù)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫(kù)存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格,所有這些保證了我們向您提供的最專(zhuān)業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

中文名稱(chēng)

總膽固醇(TC)含量試劑盒-可見(jiàn)分光光度法

規(guī)格 48樣
貨號(hào)

L-738-SH

價(jià)格 ¥200
樣本類(lèi)型 血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等
檢測(cè)范圍 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
檢測(cè)方法

可見(jiàn)分光光度法

貨期 3-5天
說(shuō)明書(shū) 咨詢(xún)我司業(yè)務(wù)員獲取
文獻(xiàn) 咨詢(xún)我司業(yè)務(wù)員獲取

    正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

TC包括游離膽固醇和膽固醇酯。TC是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。

 

測(cè)定原理:

利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;最后利用過(guò)氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類(lèi)化合物;在500nm有特征吸收峰,其顏色深淺與TC含量成正比。

 

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、異丙醇和蒸餾水。

 

試劑組成和配

試劑一:異丙醇50mL(自備)。

試劑二:液體50mL×1瓶,4℃保存;

試劑三粉劑×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體100μL×1瓶,4℃保存

TC標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,0.5μmol/mL4℃保存。

 

TC的提取:

1、組織中TC的提取:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清,即TC待測(cè)液。

2、細(xì)胞、細(xì)菌中TC的提取:先收集400-500萬(wàn)細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強(qiáng)度20%,超聲2s,停1s),即TC待測(cè)液。

3、血清(漿)等樣品:直接測(cè)定。

 

測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到500 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. TC工作液的配制:臨用前,吸取約0.8mL試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中,充分溶解后再全部轉(zhuǎn)移回試劑二瓶中,充分混勻,TC工作液置于37℃水浴10min用不完的工作液4℃保存一周。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC標(biāo)準(zhǔn)液和900μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測(cè)定A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測(cè)定管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC待測(cè)液和900μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測(cè)定A測(cè)定管。

5. 空白管:依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL 試劑一900μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測(cè)定A測(cè)定管。

注意:標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測(cè)定一次。

 

計(jì)算公式:

1. 血清(漿)TC含量:

TCμ mol /dL= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×100

= 50×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL100 mL1dL=100 mL

2. 組織TC含量:

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

TCμ mol/mg prot= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

   = 0.5×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算

TCμ mol / g鮮重= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

0.5×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL;樣本蛋白濃度mg/mLW樣本質(zhì)量,g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中TC含量:

TCμ mol /104 cell= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /L

0.5×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /L

C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL

 

注意事項(xiàng):

最低檢出限為1nmol/mL

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