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生化試劑盒

總膽固醇(TC)含量試劑盒-微量法
恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛,涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業最優質的服務。

中文名稱

總膽固醇(TC)含量試劑盒-微量法

規格 96樣
貨號

L-739-SH

價格 ¥390
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法

微量法

貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業務員獲取
文獻 咨詢我司業務員獲取

    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

TC包括游離膽固醇和膽固醇酯。TC是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。

 

測定原理:

利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),從而把膽固醇酯轉化為FC進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;最后利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰,其顏色深淺與TC含量成正比。

 

自備儀器和用品:

水浴鍋、可調式移液槍、酶標儀、96孔板。

 

試劑組成和配置:

試劑一:異丙醇100mL(自備);

試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存;

試劑三粉劑×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體40μL×1瓶,4℃保存;

TC標準品:液體1mL×1支,0.5μmol/mL4℃保存。

 

TC的提取:

1、組織中TC的提取:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清,即TC待測液。

2、細胞、細菌中TC的提取:先收集400-500萬細胞或細菌到離心管內,棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強度20%,超聲2s,停1s,即TC待測液。

3、血清(漿)等樣品:直接測定。

 

測定操作:

1. /酶標儀預熱30 min,調節波長到500 nm

2. TC工作液的配制:臨用前,吸取約0.8mL試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中,充分溶解后再全部轉移回試劑二瓶中,充分混勻,TC工作液置于37℃水浴10min用不完的工作液4℃保存一周。

3. 標準管:依次在96孔板中加入20μL FC標準液和180μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A標準管。

4. 測定管:依次在96孔板中加入20μL FC待測液和180μLTC工作液,混勻,37℃靜置3h500nm測定A測定管。

5. 空白管:依次在96孔板中加入20μL 試劑一180μLTC工作液,混勻,37℃靜置3h500nm測定A測定管。

注意:標準管和空白管只需測定一次。

 

計算公式:

1. 血清(漿)TC含量計算:

TCμ mol /dL=C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)×100

 =50×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)

C標準液:0.5μmol/mL100 mL1dL=100 mL

2. 組織TC含量計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算

TCμ mol / mg prot= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

    = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

(2)按樣本質量計算

TCμ mol / g 鮮重= C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

    = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

C標準液:0.5μmol/mL;樣本蛋白濃度mg/mLW樣本質量,g/mL

3. 細胞、細菌中TC含量計算:

TCμ mol /104 cell=C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

    =0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell /L

C標準液:0.5μmol/mL

最低檢出限為1nmol/mL

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